ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ


ИРНAP05130916, Номер госрегистрации0118РК00167

НаименованиеИзучение возможности применения бактериофагов, выделенных из объектов окружающей среды Казахстана для создания новых антибактериальных средств

Приоритетное направлениеНаука о жизни и здоровье

Вид исследованияПрикладное

ЗаявительТОО "Научно-производственный центр микробиологии и вирусологии"

Научный руководительАлексюк Павел Геннадьевич

Балл ГНТЭ28.67

Общая одобренная сумма24000000


Ожидаемые результаты

В результате выполнения проекта будет произведён сбор образцов почвы и воды с последующим выделением из них бактериофагов, будет проведено изучение литических свойств выделенных бактериофагов на модели тест-культур E. coli, Ps. aeruginosa, будет создана библиотека генов выделенных бактериофагов, будет проведена оценка литической активности спектра специфичности выделенных бактериофагов в отношении к используемым тест-культурам и отобраны наиболее активные варианты. На основе отобранных литических фагов будут разработаны биотехнологические препараты, обладающие антибактериальной активностью по отношению к E. coli, Ps. aeruginosa, будет проведено изучение спектра активности биопрепарата, созданного на основе выделенных литических фагов, будут отработаны оптимальные условия использования созданного биопрепарата, проведено изучение его стабильности и разработаны нормативные документа.


Реферат (Абстракт) - 2018 год

Объект исследования, разработки или проектирования

Образцы почвы, образцы воды, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, бактериофаги лизирующие Escherichia coli и Pseudomonas aeruginosa.

Цель работы

Изучение литических свойств бактериофагов, выделенных из объектов окружающей среды Казахстана, и выявление возможности создания новых антибактериальных средств на основе литических фагов для снижения уровня нозокомиальных инфекций.

Методы исследования

Использовали современные сертифицированные вирусологические, микробиологические, биохимические и молекулярно-биологические методы исследования. Также использовали собственные методические разработки, защищенные авторскими свидетельствами, или подготовленные, утвержденные и опубликованные в печати в виде "Методических рекомендаций".

Полученные результаты и новизна

Установлено, что выявленные бактериофаги кишечной и синегнойной палочки в основном относятся к трем семействам порядка Caudovirales: Myoviridae, Podoviridae и Siphoviridae. При помощи метагеномного анализа показано, что наиболее широким разнообразием бактериофагов E. coli и Ps. aeruginosa обладают объекты окружающей среды с неблагополучной санитарной обстановкой. Отобрано 5 образцов почвы и 5 образцов воды из которых было выделено 6 штаммов бактериофагов, лизирующих кишечную палочку и 6 штаммов бактериофагов лизирующих синегнойную палочку. Установлено, что все выделенные бактериофаги обладают высоким титром вирусных частиц, значительным уровнем литической активности, от 10-6 до 10-9, и видоспецифичностью по отношению к хозяину, что дает основание предполагать возможность использования данных штаммов бактериофагов для разработки новых антимикробных препаратов, предназначенных для борьбы с нозокомиальными инфекциями.

Основные конструктивные и технико экономические показатели

Создано 12 библиотек геномов бактериофагов, средний размер фрагмента которых составлял 700-900 нуклеотидов, что полностью соответствует требованиям для проведения качественного множественного параллельного секвенирования на приборе MiSeq.

Область применения

Медицина, промышленная биотехнология, вирусология и микробиология.

Скачать отчет за 2019 год (Русская версия)

Реферат (Абстракт) - 2019 год

Объект исследования, разработки или проектирования

Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, бактериофаги лизирующие Escherichia coli и Pseudomonas aeruginosa.

Цель работы

Изучение литических свойств бактериофагов, выделенных из объектов окружающей среды Казахстана, и выявление возможности создания новых антибактериальных средств на основе литических фагов для снижения уровня нозокомиальных инфекций.

Методы исследования

Использовали современные сертифицированные вирусологические, микробиологические, биохимические и молекулярно-биологические методы исследования. Также использовали собственные методические разработки, защищенные авторскими свидетельствами, или подготовленные, утвержденные и опубликованные в печати в виде "Методических рекомендаций".

Полученные результаты и новизна

В результате проведённых исследований за 2019 год установлено, что все исследуемые бактериофаги обладали максимальной литической активностью в дозе 105 вирусных частиц в мл. Данная доза указывает на высокую эффективность штамма, в связи с чем все исследуемые бактериофаги были отобраны для дальнейших исследований. Показано, что ни один из исследуемых штаммов бактериофагов не обладал способностью подавлять рост всех используемых бактериальных тест-культур. В свою очередь исследуемые бактериофаги обладали высокой активностью по отношению к определённым штаммам E. coli или P. aeruginosa, и способны были полностью подавлять рост до 6 тестовых штаммов бактерий. Поэтому в дальнейших исследованиях необходимо будет использовать смесь литических фагов так называемые фаговые коктейли. Установлено, что разработанные на основе коктейлей бактериофагов E. coli и P. aeruginosa биопрепараты обладали максимальной литической активностью в концентрациях 105 вирусных частиц в мл, что является стандартом для коммерческих фаговых препаратов и показывает их высокую антибактериальную активность. Установлено, что разработанные на основе коктейлей бактериофагов биопрепараты способны полностью подавлять рост как минимум 9 клинических штаммов E. coli и 10 клинических штаммов P. aeruginosa, что обеспечивает данным биопрепаратам широкий спектр активности и как следствие высокую эффективность при практическом применении в целях снижения уровня обсеменённости патогенными E. coli и P. aeruginosa.

Основные конструктивные и технико экономические показатели

На основе бактериофагов разработано 2 препарата способных в течении 6 часов полностью подавлять рост как минимум 9 патогенных штаммов E. coli и P. aeruginosa.

Область применения

Медицина, промышленная биотехнология, вирусология и микробиология.

Скачать отчет за 2020 год (Русская версия) Скачать отчет за 2020 год (Английская версия)

Реферат (Абстракт) - 2020 год

Объект исследования, разработки или проектирования

Образцы почвы, образцы воды, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, бактериофаги лизирующие Escherichia coli и Pseudomonas aeruginosa.

Цель работы

Изучение литических свойств бактериофагов, выделенных из объектов окружающей среды Казахстана, и выявление возможности создания новых антибактериальных средств на основе литических фагов для снижения уровня нозокомиальных инфекций.

Методы исследования

Использовали современные сертифицированные вирусологические, микробиологические, биохимические и молекулярно-биологические методы исследования. Также использовали собственные методические разработки, защищенные авторскими свидетельствами, или подготовленные, утвержденные и опубликованные в печати в виде "Методических рекомендаций".

Полученные результаты и новизна

Из образцов окружающей среды выделено 12 штаммов бактериофагов лизирующих E. coli и 8 штаммов бактериофагов лизирующих P. aeruginosa. По морфологическим признакам вирусных частиц все выделенные штаммы вирусов относятся к порядку Caudovirales, семейства Myoviridae и Siphoviridae. На основе выделенных фагов создана библиотека. Установлено, что все исследуемые бактериофаги обладали максимальной литической активностью в дозе 105 вирусных частиц в мл. Исследуемые бактериофаги обладали высокой активностью по отношению к определённым штаммам E. coli или P. aeruginosa, и способны были полностью подавлять рост до 9 тестовых штаммов бактерий. Установлено, что разработанные на основе коктейлей бактериофагов E. coli и P. aeruginosa биопрепараты обладали максимальной литической активностью в концентрациях 105 вирусных частиц в мл и способны полностью подавлять рост 90% используемых в исследованиях штаммов E. coli и P. aeruginosa. Установлено, что для практического применения разработанных биопрепаратов эффективной дозой является 106 – 108 вирусных частиц в 1 мл, хранение приготовленных коктейлей бактериофагов E. coli и P. aeruginosa в стерильных условиях при 4…8° С или лиофильном высушивании полностью сохраняет их первоначальный уровень литической активность. Разработаны пакеты нормативно технической документации для производства биопрепаратов созданных на основе литических бактериофагов E. coli и P. aeruginosa.

Основные конструктивные и технико экономические показатели

На основе выделенных бактериофагов разработано 2 препарата (коктейли бактериофагов) способных полностью подавлять рост как минимум 9 патогенных штаммов E. coli и P. aeruginosa при их распылении на различные поверхности. Минимальная эффективная доза препаратов составляет 106 вирусных частиц в 1 мл, сохранение первоначальной активности препаратов – минимум 8 месяцев при лиофилизации или хранении в стерильных условиях при 4…8°С.

Область применения

Медицина, промышленная биотехнология, вирусология и микробиология.