Отечественные и интродуцированные сорта яблони

Цель этапа 2018г – Отбор хозяйственно-ценных сортов яблони и получение асептических растений in vitro. Тестирование на наличие грибных и бактериальных инфекций, отбраковка заражённых. Размножение на стандартных питательных средах для проведения экспериментов по разработке универсальной среды для клонального микроразмножения.

Методы исследований – использованы методические указания по клональному микроразмножению и сортоизучению плодовых культур, а также публикации по тематике исследований.

В процессе работы отобраны 20 хозяйственно-ценных чистосортных сорта яблони отечественной и зарубежной селекции, с высокими хозяйственно-ценными признаками. Проведены эксперименты по определению условий введения in vitro и размножению яблони на искусственных питательных средах. Определены способы, препараты и их концентрации для стерилизации эксплантов яблони от микрофлоры при введении in vitro: а) HgCl2 0,2% в экспозиции 4 мин. б) HgCl2 0,1 % – 6 мин, с последующей обработкой 3% Н2О2 – 4 мин. в) «Доместос» + H20 1:5 – 20 мин. Получены асептические растения in vitro 20 сортов яблони. Микрорастения тестированы на наличие инфицированности грибными и бактериальными болезнями на провокационной среде VISS, обракованы заражённые. Свободные от грибных и бактериальных заболеваний пробирочные растения яблони размножены (2 034 шт) в искусственных условиях для начала проведения экспериментов по разработке регламента и универсальной среды для клонального микроразмножения.

Отобранные и размноженные in vitro 20 сортов яблони (2 034 микрорастений) отечественной и зарубежной селекции, обладающие высокими хозяйственно-ценными признаками, представляющие коммерческий интерес в производстве саженцев с применением биотехнологии клонирования.

Область применения – биотехнология, сельское хозяйство.

Объектами исследований являлись отечественные и интродуцированные сорта яблони.

Разработать универсальную питательную среду и регламент клонального микроразмножения для различных генотипов яблони с использованием прикладного про-граммного обеспечения Design–Expert®.

Изучение проводили с применением прикладного программного обеспечения Design–Expert® и использованием методологии Response Surface (RSM).

Установлен минеральный состав универсальной питательной среды для клонального микроразмножения яблони. Такой средой в наших экспериментах является обобщённая сре-да, содержащая NH4NO3 – 825мг/л (0,5×МС), CaCl2 – 165 мг/л(0,5×МС), MgSO4 – 185 мг/л(0,5×МС), KNO3 – 1950 мг/л(1×МС), KH2PO4 – 170мг/л (1×МС), микроэлемнты – (2×МС). H3BO312,4мг/л, МnSO4 ∙ 5H2O48,2мг/л, ZnSO4 ∙ 7H2O21,2мг/л, KJ1,66мг/л, Na2MoO4 ∙ 2H2O0,5мг/л, СuSO4 ∙ 5H2O0,05мг/л, CoCl2 ∙ 6H2O0,05мг/л, FeSO4 ∙ 7H2O55,6мг/л, Na2ЭДТА ∙ 2H2O74,5мг/л. На основе проведенных экспериментов и полученных результатов 2018-2019 гг был разработан биотехнологический регламент клонального микроразмножения яблони, состо-ящий из 3 этапов: 1й этап – Изолирование образцов и введение в культуру in vitro, 2й этап – Клонирование в асептических условиях, 3й этап – Ризогенез in vitro.

Разработан регламент клонального микроразмножения сортов яблони местной и зарубежной селекции.

Биотехнология, сельское хозяйство

Отечественные и интродуцированные сорта яблони.

Разработка универсального биотехнологического регламента клонального микроразмножения яблони с использованием современного программного обеспечения. Ускоренное размножение in vitro новых отечественных и интродуцированных сортов для внедрения в практику агропромышленного производства элитных саженцев и пополнения генофонда.

В процессе исследований использованы методические указания и публикации по тематике исследований, а также опыт работы исполнителей проекта.

Отобраны и введены in vitro 20 генотипов яблони. Разработан минеральный состав питательной среды для ускоренного размножения in vitro различных генотипов яблони. Модель эксперимента основывалась на минеральном составе питательных веществ среды MС в концентрации от 0,5 до 3x исходных. Для разработки модели и обработки результатов использовано программное обеспечение Design Expert®, что является новым для культуры яблони. Оптимизированные среды были определены для каждого из сортов на основе разработанных моделей. Наиболее важными элементами питания был нитрат аммония в сниженной концентрации (0,5x MС), и вдвое повышенные концентрации микроэлементов (2x MС). Большинство других элементов минерального питания хорошо проявили себя в сниженных вдвое концентрациях 0,5x. Обобщенная среда из трёх оптимизированных (микроэлементы (2xМС); NH4NO3, CaCl2, MgSO4 (0,5xМС); KNO3, KH2PO4 (1×МС) значительно превышала все показатели качества. Разработан «Регламент клонального микроразмножения сортов яблони местной и зарубежной селекции». Растения яблони in vitro депонированы в условия замедленного метаболизма (+4 ± 2ºС) на питательную среду МС: содержащую 25 или 50% солей нитрата азота, 0,5 мг/л абсцизовой кислоты, 2% сахарозы или 2% маннита и 2% сахарозы в отсутствии фитогормонов. Создана клоновая коллекция гермоплазмы яблони in vitro, состоящая из 37 генотипов. Растения 20 сортов, адаптированы и пересажены в не стерильные условия защищённого грунта.

Разработан универсальный состав питательной среды для клонального микроразмножения несколько генотипов яблони: микроэлементы (2xМС); NH4NO3, CaCl2, MgSO4 (0,5xМС); KNO3, KH2PO4 (1×МС). Разработан «Регламент клонального микроразмножения сортов яблони местной и зарубежной селекции». Создана клоновая коллекция гермоплазмы яблони in vitro, состоящая из 37 генотипов. Растения 20 сортов, адаптированы и пересажены в не стерильные условия защищённого грунта.

Биотехнология, сельское хозяйство.